Para mantener un equilibrio adecuado entre los radicales libres y los sistemas antioxidantes, es importante proporcionar al cuerpo un suministro adecuado de moléculas con propiedades antioxidantes desde el exterior, para evitar que se agoten las defensas naturales contra los radicales, que consisten en la barrera antioxidante. dejando las biomoléculas expuestas a la agresión de especies reactivas que comprometen su funcionalidad.
Las moléculas antioxidantes, que se pueden tomar con la dieta a través del consumo de alimentos ricos en estas sustancias, o a través de suplementos específicos, son numerosas e incluyen polifenoles, vitaminas, carotenoides y muchas otras sustancias. Estos compuestos son capaces de reaccionar con los radicales libres, reduciendo su reactividad y generando moléculas menos peligrosas que se eliminan fácilmente del cuerpo.
También es importante tener en cuenta que los antioxidantes actúan con diferentes mecanismos y con diferentes eficiencias dependiendo del tipo de radical involucrado en la reacción. De hecho, cada antioxidante es capaz de llevar a cabo su acción de contraste sobre unos pocos radicales específicos, por lo que es necesario que la contribución de los antioxidantes exógenos sea lo más variada posible, de modo que las diferentes moléculas puedan actuar de manera complementaria o de manera complementaria. Sinergia en la protección de biomoléculas de la oxidación por especies radicales de diferente naturaleza.
En este sentido, la atención de la investigación se ha centrado en la profundización de los mecanismos con los que los antioxidantes protegen las células. En particular, es muy importante medir la cantidad de antioxidantes introducidos con la dieta o la efectividad de la barrera antioxidante, para poder corregir cualquier situación de riesgo de manera específica.
La principal dificultad para medir la eficacia antioxidante de una sustancia se debe al hecho de que las especies de radicales libres que participan en la determinación del estrés oxidativo son numerosas y reaccionan con las biomoléculas con diferentes velocidades y mecanismos. Debido a la diferente naturaleza de los radicales libres, es extremadamente difícil identificar un método de análisis que permita medir de forma unívoca la capacidad de un compuesto para contrarrestar la acción oxidante de las especies reactivas, especialmente cuando se trata de matrices complejas como Sangre, alimentos o extractos de plantas. De hecho, los radicales libres difieren en la reactividad, para el tipo de biomolécula diana, para la matriz biológica en la que actúan y para la afinidad físico-química (ambiente lipófilo o hidrófilo), así como para el mecanismo con el que se generan.
Además, para comparar los datos medidos de diferentes sustancias, es importante intentar estandarizar los métodos utilizados tanto como sea posible. Un método analítico ideal debe ser ante todo simple y fácilmente reproducible, para garantizar una buena repetibilidad de los resultados. Además, debe usar radicales biológicamente significativos, que reaccionan con mecanismos claros y conocidos, para simular lo más posible in vitro lo que ocurre en el organismo, minimizando la interferencia. Finalmente, una prueba ideal debería ser versátil para permitir la medición de sustancias hidrófilas y lipófilas.
Actualmente no existe un único método válido para medir el poder antioxidante de un compuesto, que responda a las características descritas. Por lo tanto, es necesario recurrir a la combinación de los resultados de varios ensayos basados en mecanismos y diferentes especies radicales, para alcanzar un compromiso, que también tenga en cuenta el uso final de los resultados en sí mismos.
Establezca lo que desea medir y por qué es importante no solo para la elección de los métodos de medición más adecuados, sino también para el uso del protocolo de extracción más adecuado, ya que los antioxidantes representan una familia muy grande de compuestos con características físico-químicas muy diferentes. y no existe una técnica de extracción capaz de extraer todos los antioxidantes presentes en una matriz compleja, al mismo tiempo que se minimiza la presencia de posibles interferentes que pueden distorsionar los resultados.
METODOS ANALITICOS
La forma más directa de evaluar la capacidad de un compuesto para proteger las células y los tejidos del estrés oxidativo es medir la capacidad antioxidante de la sangre después de tomar el mismo compuesto, es decir, la eficacia de fortalecer la barrera antioxidante, que incluye todos los componentes. Sustancias antioxidantes presentes en la sangre. Las pruebas elaboradas generalmente tienen características muy específicas y pueden medir la acción de un tipo particular de antioxidante en condiciones bien definidas. Sin embargo, los diferentes antioxidantes presentes en la sangre no actúan por separado, sino que realizan una acción estrictamente interconectada para crear una sinergia que permita una protección óptima contra la agresión de los radicales libres. Por lo tanto, la verdadera medida de la capacidad antioxidante total no puede reducirse a la mera suma de la capacidad antioxidante de los componentes individuales, y es imposible determinar la acción general de los sistemas antioxidantes en fluidos biológicos mediante un solo ensayo.
Una forma alternativa es medir in vitro el poder antioxidante de las sustancias exógenas que se toman con la dieta (alimentos y suplementos). En este caso, sin embargo, debe tenerse en cuenta que esta es una medida del potencial antioxidante de un compuesto, que solo proporciona una aproximación de su capacidad para ejercer una acción protectora real en los compartimentos biológicos contra la agresión de los radicales libres, ya que evalúa cuantitativamente, los antioxidantes presentes, pero no proporcionan ninguna información sobre su biodisponibilidad y su eficacia cuando se introducen en el organismo.
Los métodos para medir la capacidad antioxidante se pueden dividir en dos categorías según el mecanismo por el cual reaccionan con los radicales libres para inactivar su reactividad:
- Los métodos HAT (Transferencia de átomo de hidrógeno), que se basan en la capacidad de una sustancia para realizar su acción antioxidante mediante la liberación de un átomo de hidrógeno a la especie radical;
- Los métodos SET (Single Electron Transfer), que evalúan la capacidad de una sustancia para reducir los radicales libres mediante la transferencia de electrones.
Algunos de los métodos analíticos empleados pueden actuar con ambos mecanismos.
Sobre la base de lo que se ha dicho hasta ahora, está claro que la cantidad de pruebas desarrolladas para la determinación de la capacidad antioxidante y anti-radical es muy alta, por lo que resumiremos brevemente las más generalizadas y significativas, tratando de resaltar sus fortalezas y límites. .
